Caltech 新方法 ACE 一步转移 200 万碱基,造出三菌混合嵌合基因组
NikoMcCarty · x · 2026-11-11
Caltech Kaihang Wang 组在论文中提出 ACE(Additive Conjugative-CAST Engineering),可一步在细菌间转移约 200 万碱基的 DNA,做出「细菌嵌合体」:一株菌含 E. coli DH10B 的 4.6M 碱基、 recoded 菌株 Syn61 的 2M 碱基和约 900kb 志贺菌 DNA,证明可跨细菌属操作。
原理:在供体菌中给目标 DNA 加上 CassetteSTART/END 两侧序列,供体表达辅助质粒通过接合转移把 DNA 送入受体,第二个辅助质粒再用 CRISPR 关联转座酶把它插入受体基因组的指定位置。
效果:转移 1M 碱基片段时每实验可得约 1000 个成功克隆;三个靶点上 98.1–99.7% 的插入落在预期位点;RNA 测序显示所有供体基因都表达。
用途:比人工组装大片段更快更便宜,可把某菌株的生物合成通路整体「移植」到更易培养或用于生物制造的菌株中;也适用于合成 DNA,理论上可让菌株成为「永久供体」持续向其他菌转移。作者提到该课题已做了至少 8 年。
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